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Tipo: Trabalho de Conclusão de Curso
metadata.dc.title: Investigação da toxicidade e do potencial bioinseticida do extrato hidroalcoólico de folhas de croton campestris a. St.-Hill em modelo de drosophila melanogaster
Autor(es): Macedo, Giulianna Echeverria
Primeiro Orientador: Posser, Thaís
Coorientador: Franco, Jeferson Luis
1° Membro da banca: Zemolin, Ana Paula Pegaroro
Resumo: O Brasil possui um vasto território e um grande número de espécies vegetais. Apesar disso, há poucos estudos focados para o potencial biotecnológico da sua biodiversidade. Os vegetais possuem metabólitos secundários, substâncias com reconhecidas propriedades biológicas, que podem servir para a sua defesa, ou como atrativos para outros organismos. Croton campestris, pop. Velame do Campo é um arbusto encontrado nas regiões Nordeste e Sudeste do país, utilizado popularmente para diversos fins terapêuticos, porém pesquisas que descrevam a toxicidade in vivo desta planta são escassas. Portanto, o presente estudo teve por objetivo a investigação da toxicidade e da possível atividade bioinseticida do extrato hidroalcoólico de folhas de C. campestris em Drosophila melanogaster. D. melanogaster, conhecida como a mosca da fruta, é um modelo biológico ideal para biensaios, devido suas inúmeras vantagens em pesquisa. Para a realização dos experimentos, moscas adultas de ambos os sexos foram tratadas com chumaço de algodão embebido com soluções definidas como: controle (sacarose 1%), 0,1 1 10 e 50mg/mL do extrato diluído em sacarose 1% durante 07 dias (mortalidade) e 72h (atividade locomotora e demais ensaios bioquímicos). Para estimar a sobrevivência, as moscas mortas foram contadas diariamente até o término do tratamento. A atividade locomotora foi avaliada através do teste de Geotaxia Negativa, e os demais ensaios bioquímicos envolveram: a análise da viabilidade celular pelo ensaio de 3-(4,5-dimetiltiazol-2yl)-2,5-difenil brometo de tetrazolina (MTT) e da redução da fluorescência da Resazurina; análise do estresse oxidativo através da oxidação da 2'7'-diclorofluoresceína diacetato (DCF-DA); determinação de Tióis; atividade das enzimas antioxidantes catalase, glutationa S-transferase, superóxido dismutase e da enzima acetilcolinesterase; fosforilação das proteínas MAPK, ERK, JNK e p38; atividade antioxidante in vitro através dos ensaios de DPPH, FRAP e ABTS+; e posteriormente o efeito de C. campestris em associação ao herbicida Paraquat. Deste modo, nossos resultados demonstraram que após tratamento de 07 dias C. campestris causou significativa mortalidade das moscas, e após tratamento de 72 horas diminuiu a atividade locomotora, reduziu a viabilidade celular, também houve um aumento do índice geral de estresse oxidativo, e da atividade das enzimas antioxidantes, aumento da fosforilação de p38, e inibição da JNK2. Além disso, C. campestris potencializou o efeito de Paraquat, induzindo a mortalidade e causando déficit locomotor em D. melanogaster. Sendo assim, os dados obtidos neste trabalho demonstram pela primeira vez, a toxicidade de C. campestris e o seu potencial bioinseticida e biotecnológico.
Abstract: Brazil has a vast territory and a large number of plant species. Despite this, there are few studies focusing on biotecnological potential of its biodiversity. Plants have secondary metabolites, substances with known biological properties, which may serve as a defense, or as attractive to organisms. Croton campestris, pop. Velame do campo is a shrub found in the Northeast and Southeast regions of the country, popularly used for therapeutic purposes, but research describing the in vivo toxicity of this plant are scarce. Therefore, the present study was aimed to investigate the toxicity and possible bioinsecticide activity of the hydroalcoholic extract of leaves of C. campestris in Drosophila melanogaster. D. melanogaster, known as the fruit fly, is an ideal biensaios because of its numerous advantages in biological research model. For the experiments, adult flies of both sexes were treated as follows: control (1% sucrose), 0.1 1 10 and 50mg/mL of extract diluted in 1% sucrose for 07 days (mortality) and 72h (locomotor activity and other biochemical assays). To estimate survival, dead flies were counted daily until the end of treatment. Locomotor activity was evaluated using the Negative Geotaxis assay and other biochemical tests involved: analysis of cell viability assay by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and fluorescence reduction of Resazurin; analysis of oxidative stress by oxidation of 2´,7´-dichlorofluorescein diacetate (DCF-DA); determination of thiols; activity of antioxidant enzymes catalase, glutathione S-transferase, superoxide dismutase, and enzyme acetylcholinesterase; phosphorylation of MAPK, ERK, JNK and p38 proteins, in vitro antioxidant activity through DPPH assays, FRAP and ABTS+, and subsequently the effect of C. campestris in combination with herbicide Paraquat. Thus, our results demonstrated that after 07 days of treatment C. campestris caused significant mortality of flies, and 72 hours after treatment decreased locomotor activity, reduced cell viability, there was also an increase in the general index of oxidative stress, and activity of antioxidant enzymes, increased phosphorylation of p38 and inhibition of JNK2. In addition, C. campestris potentiated the effect of Paraquat, inducing locomotor deficits and causing mortality in Drosophila melanogaster. Therefore, the data obtained from this study demonstrate for the first time, the toxicity of C. campestris and its potential biopesticide and biotechnology.
metadata.dc.subject: Croton campestris
Drosophila melanogaster
Bioinseticida
Viabilidade celular
Toxicidade
Bioinsecticide
Cell viability
Toxicity
CNPQ: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS
Idioma: por
metadata.dc.publisher.country: Brasil
metadata.dc.publisher: Universidade Federal do Pampa
Sigla da Instituição: UNIPAMPA
Campus: Campus São Gabriel
metadata.dc.identifier.citation: MACEDO, Giulianna Echeverria. Investigação da toxicidade e do potencial bioinseticida do extrato hidroalcoólico de folhas de croton campestris a. St.-Hill em modelo de drosophila melanogaster. 2014. 52 f. Trabalho de conclusão de curso (Curso de Biotecnologia). Universidade Federal do Pampa. Campus São Gabriel. São Gabriel. 2014.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
metadata.dc.identifier.uri: http://dspace.unipampa.edu.br:8080/jspui/handle/riu/4363
metadata.dc.date.issued: 21-Mar-2014
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