Please use this identifier to cite or link to this item: http://dspace.unipampa.edu.br:8080/jspui/handle/riu/235
metadata.dc.type: Dissertação
Title: Estudo de Determinação Cromatográfica e Avaliação das Atividades Antifúngica e Anti-hipertensiva de Extratos Obtidos de Cuphea Glutinosa Cham. & Schltdl (lythraceae)
Study of Chromatographic Determination and Evaluation of the Antifungal and Antihypertensive Activities of Extract S Obtained from Cuphea Glutinosa Cham . & Schltdl (lythraceae)
metadata.dc.creator: Santos, Marí Castro
metadata.dc.contributor.advisor1: Mendez, Andreas Sebastian Loureiro
metadata.dc.description.resumo: O gênero Cuphea, popularmente conhecido no Brasil por “sete-sangrias”, tem seu uso medicinal reconhecido devido aos efeitos diurético, hipotensor e cardioprotetor. No sul do Brasil, em região característica do bioma Pampa, foi encontrada a espécie Cuphea glutinosa Cham. & Schltdl. Embora o uso popular, esta espécie é pouco descrita na literatura. O presente trabalho tem como objetivos o estudo da composição química dos extratos de C. glutinosa e a avaliação das atividades antifúngica e anti-hipertensiva. O material vegetal foi coletado na cidade de Uruguaiana (RS, Brasil), identificado e depositado em herbário. Após secagem e trituração do material vegetal, foram obtidos os extratos hidroetanólicos através de maceração exaustiva com etanol 40% (v/v) para folhas e etanol 70% (v/v) para raízes. Para a infusão, utilizou-se água a 80oC. As análises cromatográficas foram realizadas em equipamento cromatógrafo a líquido Prominence Shimadzu, em técnica por CLAE e CLUE. Utilizou-se sistema de fase reversa, eluição por gradiente com fase móvel composta por acetonitrila:metanol (4:1) e ácido fórmico 0,1% pH 3,0, coluna C18 analítica e fast, e detecção por UV-DAD e ESI-MS. Os teores de polifenóis totais e de flavonóides foram determinados por método colorimétrico, seguindo metodologia padronizada. A atividade antifúngica in vitro foi realizada utilizando o método de microdiluição em caldo, determinando-se a CIM, in-vitro, contra diferentes isolados clínicos. Para avaliação do potencial anti-hipertensivo in vivo, foram realizadas medições da pressão sanguínea pelo método de monitoramento hemodinâmico invasivo, através da inserção de cateter na artéria carótida. Os resultados de teor de fenólicos totais indicaram predominância destes componentes em extratos obtidos de folhas e por maceração, conforme os valores obtidos: 1,8501 mg EAG/mL (folhas) e 0,8467 mg EAG/mL (raízes) para infusão, e 3,7284 mgEAG/mL (folhas) e 2,6266 mg EAG/mL (raízes) para maceração. Quanto ao teor de flavonóides, os resultados quantitativos foram: 7,0959 mg/g (folhas) e 0,5664 mg/g (raízes) para a infusão, e 7,9511 mg/g (folhas) e 0,5994 mg/g (raízes) para maceração. Na análise cromatográfica, os extratos obtidos das folhas de C. glutinosa apresentaram picos cromatográficos bem separados, em perfil reprodutível. Na determinação por CLUE-MS, os dados de íon molecular e fragmentos de massa indicaram a composição predominante em flavonóides, sugerindo-se os componentes quercetina-3-O-glicosídeo, quercetina-3- arabinosídeo, quercetina-3-glicuronídeo, isoramnetina e quercetina-5-O-β-glicopiranosídeo. Para o potencial antifúngico, os extratos das folhas e raízes apresentaram atividade in vitro contra Candida parapsilosis, Candida tropicalis e Trichosporon asahii, com CIM variando na faixa de 1,9-62,5 μg/mL. Nos testes hemodinâmicos realizados, os extratos das folhas não apresentaram efeito significativo sobre a pressão arterial. A identificação dos componentes em C. glutinosa, derivados de quercetina, torna promissora novas investigações a fim de aprofundar o conhecimento a respeito desta espécie, em especial na busca de respostas para a relatada ação anti-hipertensiva.
Abstract: The Cuphea genus, popularly known in Brazil as "sete-sangrias", is used traditionally due the diuretic, hypotensive and cardioprotective effects. In southern Brazil, in characteristic region of Pampa biome, it was found the species Cuphea glutinosa Cham. & Schltdl. Although used popularly, this species is few reported in the literature. The present work aimed to study the chemical composition of extracts from C. glutinosa and to evaluate the antifungal and anti -hypertensive activities. The plant material was collected in the city of Uruguaiana (RS, Brazil), identified and deposited in a herbarium. After dryness and milling, the hydroethanolic extracts were obtained through exhaustive maceration using ethanol 40% (v/v) for leaves and ethanol 70% (v/v) for roots. The infusions were prepared using water at 80 °C. The chromatographic analyses were performed in liquid chromatography Prominence Shimadzu, for HPLC and UPLC assays. The method was conducted using reverse phase system, gradient elution with mobile phase composed by acetonitrile:methanol (4:1) and formic acid 0.1% pH 3.0, C18 analytical and fast column, and detection by UV-DAD and MS. The polyphenols and flavonoids contents were determined by colorimetric method. The in vitro antifungal activity was conducted by using the broth microdilution method, determining the MIC against different clinical isolates. For evaluation of in vivo anti-hypertensive potential, the blood pressure was measured by the method of invasive hemodynamic monitoring, through of insertion the catheter into the carotid artery. The results of phenolic content indicated the high concentration of these compounds in leaves extracts obtained by maceration: 1.8501 mgEAG/mL (leaves) and 0.8467 mgEAG/mL (roots) for infusion, and 3.7284 mgEAG/mL (leaves) and 2.6266 mgEAG/mL (roots) for maceration. For flavonoids, the contents were: 7.0959 mg/g (leaves) and 0.5664 mg/g (roots) for infusion, and 7.9511 mg/g (leaves) and 0.5994mg/g (roots) for maceration. In the chromatographic analyses, the leaf extracts from C. glutinosa presented chromatographic peaks well separated and reproducible. In the determination by UPLC-MS, the molecular ion and mass fragments indicated the predominant composition in flavonoids, suggesting the compounds quercetin-3- O-glucoside, quercetin-3-arabinoside, quercetin-3-glucuronide, isorhamnetin and quercetin-5- O-β-glucopiranoside. For the antifungal potential, the leaf and roots extracts presented activity against Candida parapsilosis, Candida tropicalis e Trichosporon asahii, with MIC values ranging 1,9-62,5 μg/mL. In the hemodynamic tests performed, the leaves extracts did not present significant effect in the arterial pressure, although a tendency in pressure reduction could be observed. The identification of quercetin derivatives in C. glutinosa becomes promisor further investigations about this species, mainly in respect to the anti-hypertensive action.
Keywords: Atividade antifúngica
Atividade anti-hipertensiva
CLAE
CLUE-MS
Cuphea glutinosa
Flavonóides
Antifungal activity
Anti-hypertensive Action
Flavonoids
HPLC
UPLC-MS
Publisher: Universidade Federal do Pampa
URI: http://hdl.handle.net/riu/235
Issue Date: 17-Jul-2014
Appears in Collections:Mestrado em Ciências Farmacêuticas

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
127110045.pdf1,49 MBAdobe PDFView/Open


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.